沉默丛生蛋白表达增加肝癌细胞对抗癌药物的敏感性

作     者：郑文杰 赛文莉 姚敏 蔡胤 潘刘翃 顾娟娟 吴玮 姚登福 Zheng Wenjie;Sai Wenli;Yao Min;Cai Yin;Pan Liuhong;Gu Juanjuan;Wu Wei;Yao Dengfu

作者机构：南通大学附属医院临床医学研究中心226001 

出 版 物：《中华肝脏病杂志》 (Chinese Journal of Hepatology)

年 卷 期：2015年第23卷第11期

页      面：844-848页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家国际科技合作专项(2013DFA32150)、江苏省临床医学科技专项(BL2012053)和江苏省“六大人才高峰”项目(WSN-078) 

主　　题：癌 肝细胞 抗药性 丛生蛋白 

摘      要：目的探讨丛生蛋白（CLU）与肝癌细胞化疗药物敏感性的关系及其机制。方法通过Western blot对比分析肝癌细胞及阿霉素耐药HepG2／ADM细胞CLU蛋白表达水平;使用特异性shRNA转染HeV32／ADM细胞，并通过RT-PCR筛选CLU—mRNA有效干扰质粒；通过MTT法及荧光双染法分析HepG2／ADM细胞对常见化疗药物敏感性的变化；采用流式细胞仪分析HepG2／ADM细胞中Rh123蓄积水平的改变。计量资料两组间均数比较采用t检验，三组及以上均数比较采用方差分析，并进行SNK（q检验）两两比较；计数资料用χ^2检验。结果肝癌细胞（Hep3B、SMMC7721、PLC、HepG2）及HepG2／ADM细胞CLU过表达。与阴性对照组比较，CLU mRNA抑制率在shRNA-1组为73．68％（q=23．011，P〈0．01）、shRNA-2组为39．26%（q=11．991，P〈0．01）、shRNA-3组为62．36%（q=19．392，P〈0．01）、shRNA-4组为55．35％（q=17．149，P〈0．01）；shRNA-1转染组耐药细胞株对化疗药物敏感性明显上升，阿霉素诱导HepG2／ADM细胞凋亡增加；shRNA-1组癌细胞凋亡率为39．28％，阴性对照组凋亡率为4．92%（χ^2=196．77，P〈0．01）；Rh123蓄积水平升高，且多药耐药1mRNA表达受抑制（shRNA-1组与阴性对照组比较：q=14．604，P〈0．01）。结论沉默CLU可增加肝癌细胞对化疗药物的敏感性，提示CLU为逆转肝癌多药耐药的潜在靶目标。