应用PCR从丙型肝炎患者外周血B淋巴细胞扩增抗体基因

作     者：张建琼 张雪萍 林陵 谢维 单祥年 ZHANG Jianqiong;ZHANG Xueping;LIN Ling;XIE Wei;SHAN Xiangnian

作者机构：南京铁道医学院微生物学与免疫学教研室江苏南京210009 南京铁道医学院生物学教研室江苏南京210009 

出 版 物：《南京铁道医学院学报》 (Journal of Nanjing Railway Medical College)

年 卷 期：2000年第19卷第1期

页      面：17-20页

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：江苏省科技发展基金资助项目!(BJ97070) 

主　　题：抗体基因 外周血淋巴细胞 丙型肝炎 PCR 

摘      要：用常规RT PCR法 ,以 1组人抗体重链和轻链简并引物 ,直接从 5名丙型肝炎患者外周血混合淋巴细胞中扩增出抗体重链Fd基因和κ轻链基因。结果提示 ,用Trizol试剂提取细胞总RNA ,以Olig(dT)引导合成cDNA第一链 ,再经PCR扩增的方法 ,是值得优先采用的方法。细胞总RNA的提取不必追求高纯度 ,少量外周血即足以满足构建抗体库所需 ,简并引物可获得良好的扩增效果 。