麻鸭白细胞介素17的原核表达及鉴定

作     者：赵雯 潘志明 耿士忠 康喜龙 方强 丛秋霞 焦新安 ZHAO Wen;PAN Zhi-ming;GENG Shi-zhong;KANG Xi-long;FANG Qiang;CONG Qiu-xia;JIAO Xin-an

作者机构：扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室江苏扬州225009 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2011年第33卷第5期

页      面：408-410页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30871860) 江苏省自然科学基金资助项目(BK2010039) 江苏省高校"青蓝工程"资助项目 扬州大学中青年学术带头人培养人选资助项目 

主　　题：麻鸭 IL-17 原核表达 免疫反应性 

摘      要：为表达麻鸭白介素17(duIL-17),本研究提取ConA刺激的麻鸭脾脏淋巴细胞总RNA,RT-PCR扩增duIL-17基因片段,将该片段插入克隆载体pCR2.1中构建重组质粒pCR2.1-duIL17。将duIL-17基因片段亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,构建重组质粒pGEX-duIL17,将其转化到大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达。测序结果显示,duIL-17与参考序列(EU366165.1)相比较第174位碱基由C突变为T,并且为沉默突变。SDS-PAGE和westernblot分析显示,诱导表达的重组蛋白GST-duIL17主要以包涵体形式存在,分子量大小约为45ku,duIL-17与抗鸡IL-17抗体具有良好反应性。本研究为制备duIL-17单克隆抗体提供了实验依据。