鲤春病毒血症病毒单克隆抗体的制备及其特性鉴定

作     者：张朋 刘荭 陈孝煊 吴志新 余剑敏 杜娟 兰文升 史秀杰 郑晓聪 何俊强 贾鹏 申斯思 朱家增 ZHANG Peng;LIU Hong;CHEN Xiao-xuan;WU Zhi-xin;YU Jian-min;DU Juan;LAN Wen-sheng;SHI Xiu-jie;ZHENG Xiao-cong;HE Jun-qiang;JIA Peng;SHEN Si-si;ZHU Jia-zeng

作者机构：华中农业大学水产学院湖北武汉430070 深圳出入境检验检疫局广东深圳518045 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2011年第33卷第4期

页      面：305-308页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家863项目(2006AA100306) 国家质检总局科研项目(2007IK022) 深圳出入境检验检疫局科研项目(SZ2007105) 

主　　题：鲤春病毒血症病毒 单克隆抗体 N蛋白 

摘      要：为获得针对鲤春病毒血症病毒(SVCV)特异性的单克隆抗体(MAb),以纯化的SVCV为抗原,免疫BALB/c小鼠。将免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用间接ELISA法筛选获得4个能稳定分泌抗SVCV MAb的杂交瘤细胞株;4个杂交瘤细胞制备腹水的MAb效价为1∶160000～1∶640000。亚型鉴定结果表明,这些MAb分属2个亚型(1F1、3E1,IgG2a;3F5、4F9,IgG1),轻链均为Κ链。Western blot分析显示,MAb1F1、3F5、4F9能特异性地识别SVCV的N蛋白(47ku),3E1能特异性地识别SVCV的G蛋白(69ku)。采用相加ELISA法对抗原表位分析结果显示,1F1、3F5、4F9可能识别相同的表位,3E1则识别不同的表位。间接免疫荧光试验结果显示4株MAb均能对染毒病灶产生特异性的荧光染色。这些MAb的制备为SVCV免疫学检测方法的建立奠定了基础。