小鼠脑14-3-3蛋白ζ亚型cDNA克隆及其原核表达分析

作     者：董长松 李尧华 刘师兵 王颖 李薇 Dong Changsong;Li Yaohua;Liu Shibing;Wang Ying;Li Wei

作者机构：首都医科大学宣武医院北京老年医学研究所神经生物研究室 吉林医药学院基础护理教研室吉林132013 国家人类基因组北方研究中心北京100176 北华大学医学院寄生虫教研室吉林132013 

出 版 物：《神经解剖学杂志》 (Chinese Journal of Neuroanatomy)

年 卷 期：2006年第22卷第5期

页      面：525-529页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金重点项目(Nos.30430280 30271437 30270482) 北京市自然科学基金(7022011)资助项目 

主　　题：14-3-3蛋白 ζ亚型 小鼠脑 

摘      要：14-3-3是一类脑中丰富存在的蛋白质。在许多神经疾病患者的脑脊液中含量升高。最近的研究显示该蛋白相关于Parkinson病的病理过程。本研究采用RT-PCR法从小鼠脑中分离出编码14-3-3ζ亚型的cDNA片段,构建了基因重组质粒,分析了14-3-3ζ亚型cDNA在原核细胞中的表达并制备了基因重组蛋白。结果显示,RT-PCR扩增产物为738bp,编码245个氨基酸。重组质粒在原核细胞中的表达受IPTG诱导呈时间依赖性递增。纯化的目的蛋白在SDS-PAGE中的表观分子量为32kD,在Su-perdexS-200HR中的表观分子量为96kD。每升菌液可收获目的蛋白4.0mg。研究结果提示,14-3-3ζ亚型cDNA在原核细胞中高水平表达,基因重组蛋白易纯化可用于制备抗体和研究其生理功能。