H3N8亚型马流感病毒HA基因重组腺病毒的构建及其生物学特性的研究

作     者：刘春国 刘明 刘飞 王伟 刘大飞 刘彦云 吕让 相文华 

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室中国农业科学院黑龙江哈尔滨150001 上海兽医研究所上海200241 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2014年第44卷第4期

页      面：362-366页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：公益性行业(农业)科研专项(201303046-08) 

主　　题：马流感病毒 H3N8亚型 HA基因 重组腺病毒 生物学特性 

摘      要：为了构建表达H3N8亚型马流感病毒HA蛋白的重组腺病毒,把A/Equine/Xinjiang/3/2007(H3N8)的HA基因克隆到腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,将重组穿梭质粒pShuttle-XJ3HA电转化至BJ5183感受态细胞中,与人5型腺病毒骨架质粒同源重组,获得了重组腺病毒质粒pAd-XJ3HA。该质粒线性化后转染AD293细胞,包装重组腺病毒rAd-XJ3HA。通过PCR、间接免疫荧光试验(IFA)和Western-blot鉴定,证明HA基因已整合到腺病毒载体基因组中,并能够有效表达。该重组腺病毒在AD293细胞上连续传15代后仍表现出良好的遗传稳定性。马流感病毒HA基因重组腺病毒的成功构建为我国马流感重组病毒活载体疫苗的研究提供了技术储备。