SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白的制备及其趋化作用

作     者：居小萍 徐新颜 张晓青 刘永明 于春山 曹洋森 卢明智 陈樱 JU Xiao-ping;XU Xin-yan;ZHANG Xiao-qing;LIU Yong-ming;YU Chun-shan;CAO Yang-sen;LU Ming-zhi;CHEN Ying

作者机构：第二军医大学长海医院放射治疗科上海200433 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所上海200032 

出 版 物：《中国肿瘤生物治疗杂志》 (Chinese Journal of Cancer Biotherapy)

年 卷 期：2011年第18卷第4期

页      面：419-423页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 08[工学] 09[农学] 100102[医学-免疫学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 10[医学] 

基　　金：上海市自然科学基金资助项目(No.06ZR14114) 军队医学研究"十一五"计划课题资助项目(No.10MA004)~~ 

主　　题：SDF—1 GM—CSF 融合蛋白 肿瘤 造血 免疫 趋化 

摘      要：目的:利用基因工程技术制备SDF-1与hGM-CSF的融合蛋白(SDF-1γ/rhGM-CSF),研究该融合蛋白对肿瘤患者造血和免疫功能的增强作用。方法:构建表达SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白的pPIC9k-SDF1-rhGM-CSF1质粒,转染酵母菌,诱导SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白的表达,Western blotting鉴定SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白的表达。集落形成实验观察SDF-1γ/rhGM-CSF对骨髓细胞集落形成的影响,趋化实验检测其对未成熟树突状细胞(dendritic cell,DC)的趋化作用。结果:成功构建pPIC9k-SDF1-rhGM-CSF1质粒,高表达SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白,分子量约为25 000,并可被GM-CSF特异性抗体所识别。SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白能显著刺激骨髓细胞的集落形成,其效果强于GM-CSF(P0.05)。与SDF-1相比,SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白可更有效地趋化未成熟DC(P0.05)。结论:SDF-1γ/rhGM-CSF融合蛋白可有效促进骨髓细胞的集落形成,趋化未成熟DC,有促进肿瘤化疗患者造血和免疫功能恢复的潜在临床应用前景。