嗜热菌Bacillus fordii3-2海因酶的纯化及性质

作     者：孙倩倩 潘瑶 姚忠 何冰芳 SUN Qian-qian;PAN Yao;YAO Zhong;HE Bing-fang

作者机构：南京工业大学制药与生命科学学院南京210009 

出 版 物：《生物加工过程》 (Chinese Journal of Bioprocess Engineering)

年 卷 期：2007年第5卷第4期

页      面：32-36页

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 

基　　金：国家973资助项目(2003CB716004) 国家自然科学基金资助项目(20336010) 

主　　题：海因酶 Bacillu sfordii 3-2 纯化 酶学性质 

摘      要：对自行筛选的海因酶法L-苯丙氨酸生产菌株Bacillus fordii3-2中的海因酶进行了分离纯化及相关性质研究。该海因酶协同L-氨甲酰水解酶是海因酶法生产L-氨基酸的关键酶。且fordii3-2菌悬液经压力破碎离心后取上清液为粗酶液，粗酶液通过硫酸铵分级沉淀、Phenyl FF（high sub）疏水层析以及Source 15Q离子交换层析，经SDS—PAGE分析达到电泳纯。亚基相对分子质量为55×10^3，海因酶的纯化回收率为20．5％，纯化倍数为149．23。该海因酶在pH8．0～10．0的范围内具有较高的活性，在45—70℃具有很高的酶活力，最适反应pH和温度分别为10．0℃和65℃。纯酶易氧化失活，DTT对该酶有一定的保护作用。二价金属离子，Mn^2＋、Co^2＋及Fe^2＋对酶活性有显著的促进作用，而Ca^2＋、Cu^2＋等对酶活性有抑制作用。相关研究可为该菌株及海因酶的进一步开发与应用提供理论指导。