合浦珠母贝热休克蛋白hsp70基因的克隆与表达分析

作     者：黄桂菊 曲妮妮 喻达辉 李莉好 HUANG Gui-ju;QU Ni-ni;YU Da-hui;LI Li-hao

作者机构：上海200090 上海水产大学 中国水产科学研究院南海水产研究所 中国水产科学研究院南海水产研究所 广东广州510300 华中农业大学水产学院 湖北武汉430072 

出 版 物：《中国水产科学》 (Journal of Fishery Sciences of China)

年 卷 期：2007年第14卷第5期

页      面：726-732页

核心收录：

学科分类：0908[农学-水产] 09[农学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(30571415) 

主　　题：合浦珠母贝 热休克蛋白HSP70 同源克隆 体内表达 

摘      要：采用同源克隆和RT-PCR技术对合浦珠母贝(Pinctada fucata)热休克蛋白hsp70基因进行了克隆和表达分析。获得cDNA全长序列2 365 bp,其中3’非编码区域(UTR)为318 bp,5’UTR为88 bp,开放阅读框(ORF)为1 959 bp,编码652个氨基酸,分子量约为71.39 kD,理论等电点为5.22,并含有3个HSP70家族的签名序列IDLGTTYS、DLGGGTFD和EEVD。同源性分析表明,合浦珠母贝HSP70的氨基酸序列与太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)等双壳贝类的相似性高达86%以上,基于氨基酸序列的聚类分析表明,合浦珠母贝与牡蛎属种类亲缘关系最近。高温、高盐刺激后,半定量RT-PCR检测发现hsp70基因的表达明显增加,高温刺激的表达量高于高盐刺激,高温刺激组不同组织的表达量由大到小依次为鳃、消化腺、外套膜、肌肉、性腺,高盐刺激组不同组织的表达量由大到小依次为鳃、外套膜、肌肉、消化腺、性腺,表明HSP70参与了机体对刺激的应答过程。该基因的克隆为进一步深入研究合浦珠母贝的抗逆机理及其遗传改良奠定了重要基础。