干细胞迁移机理的近场扫描光学显微术研究

作     者：陈家楠 潘运龙 丁晖 覃莉 蔡继业 CHEN Jia-nan;PAN Yun-long;DING Hui;QIN Li;CAI Ji-ye

作者机构：暨南大学生命科学技术学院生物纳米技术实验室广东广州510632 暨南大学附属第一医院普外科广东广州510632 暨南大学医学院组织胚胎学教研室广东广州510632 

出 版 物：《分析测试学报》 (Journal of Instrumental Analysis)

年 卷 期：2010年第29卷第6期

页      面：548-552页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 070205[理学-凝聚态物理] 08[工学] 071009[理学-细胞生物学] 09[农学] 080501[工学-材料物理与化学] 0805[工学-材料科学与工程（可授工学、理学学位）] 0703[理学-化学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 0702[理学-物理学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30872404 30772131) "973计划"资助项目(2010CB/833603) 

主　　题：近场光学显微镜 间充质干细胞 黏着斑 

摘      要：将内皮细胞生长因子(VEGF)置于甲基纤维素碟中形成VEGF的浓度梯度分布,并将人脐带间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)于此浓度梯度中培养,观察VEGF能否诱导MSCs定向迁移。应用近场扫描光学显微术(Near-field scanning optical microscopy,NSOM)同时获取了VEGF诱导前后的MSCs的形貌和光学信息。结果表明,近场光学图观测到形貌图上所没有的黑色斑点,分析认为这些黑斑为细胞的黏着斑。近场光学图显示经过VEGF诱导后细胞的黏着斑数量明显增加。同时,对诱导前后干细胞的骨架蛋白进行免疫荧光标记并用共聚焦显微镜进行观察,结果表明细胞骨架由诱导前的无序状态转变为诱导后的有序状态,说明诱导后的干细胞处于迁移状态。光学超微结构图则显示了诱导后干细胞表面的光学细节比诱导前细胞大量增加,出现了大量直径约200 nm的光斑,这是由于细胞表面大量分泌黏附分子等蛋白分子引起的,这些结果为VEGF能够诱导MSCs进行定向迁移提供了实验依据和可视化证明。也表明NSOM不但能提供高分辨的光学分辨率,还可提供生物细胞精细结构的更深层次的光学信息。