吉布森巴贝虫顶膜抗原-1基因的表达及表达产物的生物学活性

作     者：杨俊 周金林 周望平 玄学南 肖兵南 邱美珍 YANG Jun;ZHOU Jin-lin;ZHOU Wang-ping;XUAN Xue-nan;XIAO Bing-nan;QIU Mei-zhen

作者机构：湖南省畜牧兽医研究所湖南长沙410131 带广畜产大学国家原虫病研究中心日本带广080-8555 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2008年第38卷第2期

页      面：128-132页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 090601[农学-基础兽医学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

主　　题：吉布森巴贝虫 顶膜抗原-1 原核表达 

摘      要：通过免疫筛选法,从构建的犬吉布森巴贝虫cDNA基因表达文库中筛选到1个cDNA克隆,此cDNA核苷酸全长2 108 bp,包含1个完整的开放阅读框,编码蛋白的分子质量约为62 ku。经过分析,此蛋白(BgAMA-1)与其他巴贝虫属的顶膜抗原-1具有较高的同源性。为了研究其生物学活性,以此cDNA为模板,利用PCR扩增BgAMA-1的全基因,并将其克隆到pGEX-4T-3载体上,构建了原核表达载体pGEX-4T-3/BgAMA-1。通过Western-blotting对表达并纯化的重组蛋白的生物学活性进行分析。结果显示,构建的pGEX-4T-3/BgAMA-1能在大肠杆菌DH5α中表达,所获的重组抗原BgAMA-1在Western-blotting上仅与吉布森巴贝虫感染犬血清发生反应,证实其具有种特异性,在诊断方面可能有一定的应用价值。