人细小病毒B19非结构基因ns1和7.5ku蛋白基因的克隆与表达

作     者：董衍明 冯志鸿 王也 张楠 王媛 徐鹏 李毅 

作者机构：华中师范大学生命科学学院湖北武汉430079 

出 版 物：《中国病原生物学杂志》 (Journal of Pathogen Biology)

年 卷 期：2010年第5卷第7期

页      面：481-484页

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 07[理学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(No.30670081) 

主　　题：人细小病毒B19 ns1 7.5ku基因 克隆与表达 

摘      要：目的通过分子克隆技术,构建人细小病毒B19非结构基因ns1和7.5kugene的原核表达载体,并诱导重组NS1和7.5ku融合蛋白的表达,为蛋白的纯化奠定基础。方法以含有B19病毒全基因组感染性克隆为模板,用PCR法扩增目的基因ns1和7.5kugene,以pET-28a为表达载体,构建重组表达质粒pET28a-ns1和pET28a-7.5ku,转化***21(DE3),获得重组工程菌株。经IPTG诱导培养6h后,通过SDS-PAGE、Western blot鉴定表达产物。结果成功构建了pET28a-ns1和pET28a-7.5ku,IPTG诱导能获得较高的目的蛋白。结论人细小病毒B19的非结构基因能在大肠埃希菌中获得成功的表达,为蛋白的纯化和抗体制备奠定基础。