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建立检测血液中EC、KP、SA和MRSA的多重PCR方法

Development of a multiplex PCR method for the rapid detection of Escherichia coli,Klebsiella pneumoniae,Staphylococcus aureus and methicillin-resistant Staphylococcus aureus

作     者:吴许文 温旺荣 李沛樟 倪金良 简仕铭 WU Xuwen;WEN Wangrong;LI Peizhang;NI Jinliang;JIAN Shiming

作者机构:暨南大学附属第一医院检验科广东广州510163 镜湖医院检验科澳门999078 

出 版 物:《国际检验医学杂志》 (International Journal of Laboratory Medicine)

年 卷 期:2019年第40卷第1期

页      面:19-24,28页

学科分类:1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 1010[医学-医学技术(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

主  题:聚合酶链反应 脓毒症 大肠杆菌 克雷伯菌,肺炎 葡萄球菌,金黄色 甲氧西林抗药性 

摘      要:目的建立快速检测血液中常见致病菌包括大肠埃希菌(EC)、肺炎克雷伯菌(KP)、金黄色葡萄球菌(SA)及耐甲氧西林SA(MRSA)的多重聚合酶链反应(PCR)方法,有利于败血症的及时治疗。方法建立多重PCR方法对EC phoA基因、KP mdh基因、SA femA基因和MRSA mecA基因进行检测,并将16SrDNA作为致病菌感染对照。结果采用建立的多重PCR方法进行检测的特异性为100%,EC检测限为2.75×102CFU/mL,KP为2.43×103 CFU/mL,SA为3.13×102 CFU/mL,MRSA为3.03×102 CFU/mL;用多重PCR方法和传统血培养方法对300个血标本进行检测,传统血培养方法检测出187个血标本内阳性,多重PCR方法有4个血标本为假阴性,未能被检出。结论建立的多重PCR方法可简便、及时地检测血流感染中的EC、KP、SA和MRSA。

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