ICR小鼠胚胎干细胞的分离与培养
Isolation and cultivation of ICR mouse embryonic stem cells(ESCs)作者机构:扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009
出 版 物:《黑龙江畜牧兽医》 (Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine)
年 卷 期:2011年第2期
页 面:1-4页
学科分类:08[工学] 0905[农学-畜牧学] 09[农学] 0836[工学-生物工程] 090501[农学-动物遗传育种与繁殖]
基 金:"863"国家高技术研究发展计划项目(2008AA101005)
摘 要:为了研究不同条件对ICR小鼠ES细胞的影响,试验以12.5~13.5dICR小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为饲养层,以3.5dICR小鼠胚胎为试验材料,探讨了血清、生长因子及传代方法对ICR小鼠Es细胞分离培养的影响。结果表明:采用含15%FBS的Es细胞培养液的囊胚贴壁率及ICM增殖率(79.3%,69.0%)均比含15%KSR、5%FBS+10%KSR的细胞培养液高(42.9%,28.6%;75.0%,54.2%),Es细胞最高传至6代;培养液中添加10.g/m LLIF+10ng/mLSCF的效果比单独添加1种因子的效果好,最高传至6代,高于单独添加1种因子的传代数(4代,2代);用3种传代方法进行传代时,采用差异贴壁法传代效果最佳,最高传至8代,酶消化法传至4代,机械加酶消化法传至6代。