shRNA抑制survivin基因表达对脐静脉血管内皮细胞增殖与凋亡的影响

作     者：马莎 林俊 晋松 李芹 张虹 王静 Ma Sha;Lin Jun;Jin Song;Li Qin;Zhang Hong;Wang Jing

作者机构：云南省第一人民医院风湿免疫科昆明650032 

出 版 物：《重庆医学》 (Chongqing medicine)

年 卷 期：2015年第44卷第35期

页      面：4922-4924,4928页

学科分类：0710[理学-生物学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 08[工学] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 10[医学] 

基　　金：云南省科技厅昆明医科大学联合专项基金资助项目(2011FB215) 

主　　题：血管内皮生长因子 存活素 shRNA 增殖 细胞凋亡 

摘      要：目的研究靶向存活素(survivin)的短发夹RNA真核表达质粒(shRNA)对脐静脉血管内皮细胞增殖与凋亡的影响。方法合成靶向survivin的shRNA真核表达质粒及阴性对照质粒,用脂质体法将质粒转染至经VEGF(50ng/mL)处理的HUVEC细胞;转染48h后,采用实时定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白印迹法检测HUVEC中survivin的mRNA表达及蛋白水平。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;TUNEL法检测细胞凋亡。结果(1)survivin-shRNA质粒试验组与阴性对照shRNA质粒组及空白对照组比较,转染48h后人脐静脉血管内皮细胞survivin的mRNA及蛋白表达水平明显下降(P0.05)。(2)与阴性对照shRNA组及空白对照组比较,转染后的人脐静脉血管内皮细胞增殖能力明显下降。转染后24、48、72h生长抑制率分别为(13.53±3.91)%、(38.97±1.82)%、(65.75±1.83)%,于转染后72h最为显著。(3)试验组凋亡率为(28.07±1.71)%,较阴性对照组(11.45±1.52)%和空白对照组(10.04±1.46)%显著增高(P0.05)。结论靶向survivin的shRNA质粒能通过下调survivin表达,进而抑制人脐静脉血管内皮细胞增殖并促进其凋亡。