艳山姜挥发油调控NF-κB信号抑制LPS诱导HAECs炎性损伤

作     者：林丹 石廷雨 杨红 吴国萍 付凌云 陶玲 沈祥春 LIN Dan;SHI Ting-yu;YANG Hong;WU Guo-ping;FU Ling-yun;TAO Ling;SHEN Xiang-chun

作者机构：贵州医科大学天然药物资源优效利用重点实验室 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2018年第24卷第19期

页      面：139-144页

学科分类：1005[医学-中医学] 100501[医学-中医基础理论] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81360650) 贵州省留学人员科技活动经费项目(黔人项目资助合同02号) 贵州省高等教育科技创新团队项目(黔教合人才团队字31) 贵州省科技创新团队项目(黔科合人才团队4025号) 贵州省高层次创新型人才百层次人才项目(贵州省科技厅黔科合人才4029号) 贵阳市科技基金项目(筑科合同药07号) 

主　　题：艳山姜挥发油 脂多糖 阿司匹林 内皮细胞损伤 Toll样受体4 核转录因子-κB 

摘      要：目的：研究艳山姜挥发油（essential oil of Alpinia zerumber fructus,EOAZF）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导人主动脉内皮细胞（human aortic endothelial cells,HAECs）炎性损伤的保护作用。方法：体外传代培养HAECs,先用不同剂量EOAZF（0.05,0.1 mg·L-1）和阿司匹林（0.5 mmol·L-1）预处理1 h,另设空白组,再与LPS（5 mg·L-1）共同作用12 h。采用噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞活性;苏木素-伊红染色进行细胞形态学观察;细胞划痕修复实验分析HAECs划痕修复能力;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测血管细胞黏附分子-1（vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1）,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）,Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）,核转录因子-κB抑制蛋白激酶（inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase,IKK）,磷酸化NF-κB抑制蛋白激酶（phospho-inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase,p-IKK）蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测细胞中TLR4和VCAM-1 mRNA的表达;免疫荧光法观察NF-κB p65的核转位情况。结果：与空白组比较,LPS能诱导HAECs形态学损伤,降低细胞存活率及划痕修复能力,同时上调VCAM-1,Caspase-3,TLR4,IKK及PIKK的表达。免疫荧光实验结果分析表明LPS能够诱导NF-κB p65的核转位。与模型组比较,EOAZF预处理后,能够改善LPS诱导的HAECs形态学损伤,提高细胞存活率及划痕修复能力,抑制VCAM-1,Caspase-3,TLR4,IKK及P-IKK的表达及NF-κB p65的核转位。结论：EOAZF对LPS诱导的HAECs炎性损伤具有保护作用,其机制与调控TLR4/IKK/NF-κB-p65信号有关。