锥虫早老素蛋白亲水区的克隆和表达纯化

作     者：赵锦 太田伸生 铃木高史 铃木光子 薮义贞 大岛茂 羽藤真理子 张仁利 ZHAO Jin;OHTA N;SUZUKI T;SUZUKI M;YABU Y;OHSHIMA S;HATO M;ZHANG Ren-li

作者机构：深圳市疾病预防控制中心深圳518020 日本名古屋市立大学医学院日本名古屋 

出 版 物：《中国比较医学杂志》 (Chinese Journal of Comparative Medicine)

年 卷 期：2008年第18卷第6期

页      面：5-8,12页

学科分类：10[医学] 

基　　金：深圳市2006科技计划项目(200602171) 

主　　题：早老素蛋白 阿尔茨海默病 布氏锥虫 蛋白表达 

摘      要：目的体外表达锥虫早老素蛋白亲水区肽段,以制备抗血清用于功能研究。方法根据锥虫早老素蛋白二级结构特性,设计引物分别扩增N端及C端片段的亲水区肽段基因,装入原核表达载体进行表达,并通过变性纯化方法获得足够量表达蛋白,制备兔抗血清。结果成功扩增并克隆锥虫早老素蛋白亲水区片段L2及L7,并分别采用变性磁珠法和变性树脂法进行大量蛋白产物纯化,浓缩纯化产物制备兔抗血清经Western blot杂交验证,出现目的蛋白大小阳性条带。结论成功表达锥虫早老素蛋推测N端及C端亲水肽段,并成功制备抗血清,可用于锥虫早老素蛋白功能分析。