十二指肠钩虫天冬氨酸蛋白酶抑制剂的克隆与表达

作     者：张振林 邓莉 杨陈 彭礼飞 

作者机构：广东医学院寄生虫学教研室广东湛江524023 

出 版 物：《中国热带医学》 (China Tropical Medicine)

年 卷 期：2009年第9卷第7期

页      面：1181-1183页

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：广东省自然科学基金(04011381) 

主　　题：十二指肠钩虫 天冬氨酸蛋白酶抑制剂 克隆 表达 

摘      要：目的克隆并表达十二指肠钩虫天冬氨酸蛋白酶抑制剂(Ad-API-1)。方法根据犬钩虫及锡兰钩虫API保守序列设计引物,RT-PCR扩增获得Ad-API-1完整阅读框序列,并将Ad-API-1成熟肽编码序列克隆、连接到原核表达载体pET32a,以构建重组表达质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,用Ni亲和层析进行纯化。结果成功克隆获得Ad-API-1完整阅读框序列;构建了pET32a/Ad-API-1重组质粒,Ad-API-1在大肠杆菌中得到了高效表达。结论成功克隆并表达Ad-API-1,为进一步研究Ad-API-1的功能,探讨其作为血清学诊断抗原或保护性疫苗奠定了基础。