铁蓄积通过激活氧化应激抑制小鼠的骨形成

作     者：朱和平 张雷炎 蒋建农 周建刚 杨帆 徐又佳 Zhu Heping;Zhang Leiyan;Jiang Jiannong;Zhou Jiangang;Yang Fan;Xu Youjia

作者机构：苏州大学附属第二医院骨科215004 江苏大学附属宜兴医院骨科宜兴214200 苏州大学骨质疏松症诊疗技术研究所215004 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2018年第35卷第8期

页      面：1485-1488页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81572179) 江苏省临床专项(BL2014044) 无锡市卫生与计划生育委员会科研青年项目(Q201732) 

主　　题：骨质疏松 骨形成 成骨细胞 铁蓄积 氧化应激 

摘      要：目的通过小鼠卵巢切除观察铁蓄积对去势小鼠骨形成的影响及其机制。方法72只小鼠随机分为3组：假手术组（E^＋F^-）、卵巢切除组（E^-F^-）、卵巢切除合并枸橼酸铁铵干预组（E^-F^＋）。每周收集各组小鼠血清、股骨样本，连续收集4周，采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中的铁蛋白（Fer）、骨钙素（OC）、碱性磷酸酶（ALP）和氧化应激指标，微计算机断层扫描技术（Micro-CT）检测股骨骨密度，实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测成骨相关基因表达。在体外培养小鼠原代成骨细胞，细胞计数试剂盒（CCK-8）检测成骨细胞增殖（CV），二氯荧光黄双乙酸盐（DCFH-DA）检测成骨细胞内活性氧（ROS）。结果与E^-F^-组比较，在E^-F^＋组发现，小鼠血清OC和ALP在第4周显著下降（OC：（88.6±8.2）比（55.3±9.2） ng/ml；ALP：（18.1±1.6）比（12.0±1.8） U/100 ml，E-F-比E-F＋），血清氧化应激指标在各个时间点均升高，除了第1周的超氧化物歧化酶（SOD），骨密度（BMD）进一步下降[（0.13±0.03）比（0.07±0.02） mg/mm3，E^-F^-比E^-F^＋]（第4周），差异均有统计学意义，提示E^-F^＋组骨组织中的Runx2、SP7和Bglap基因表达水平分别下降至E^-F^-组的76%、72%、74%（第3周）和46%、49%、36%（第4周）。体外实验中在E^-F^＋组发现：成骨细胞增殖能力在第4周下降至E^-F^-组的45%。ROS不断升高，从第2周到第4周分别为E^-F^-组的1.43、1.48、1.85倍。结论铁蓄积通过激活氧化应激抑制小鼠的骨形成。