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三维培养诱导人脂肪间充质干细胞微球的成软骨分化能力

Three-dimensional culture method induces the chondrogenic differentiation of human adipose-derived mesenchymal stem cell microspheres

作     者:毕晓娟 郭晨明 李亮 段显琳 江明 

作者机构:新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院干细胞研究室、新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054 新疆医科大学第一附属医院乳腺外科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054 新疆医科大学第一附属医院血液病中心、新疆维吾尔自治区血液病研究所新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054 

出 版 物:《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)

年 卷 期:2015年第19卷第1期

页      面:24-29页

学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

基  金:新疆医科大学第一附属医院组织工程专项基金(2012ZZGC04)~~ 

主  题:组织工程 干细胞 间质干细胞 软骨 脂肪干细胞 三维培养体系 软骨微球 诱导分化 间充质干细胞 脂肪源间充质干细胞 人脂肪间充质干细胞 无支架微球 培养条件优化 软骨诱导 

摘      要:背景:关节软骨损伤后修复结果不满意,需要新的手段,而脂肪间充质干细胞较适宜做种子细胞诱导软骨,然而怎么能够使诱导的软骨具有功能需要研究。目的:采用三维培养体系诱导人脂肪间充质干细胞微球向软骨分化。方法:无菌切取吸脂术后脂肪组织,分离培养人脂肪间充质干细胞,传至第3代进行流式细胞术分析,成骨成脂肪诱导等鉴定,同时也给予合适的培养条件用三维培养的方式向软骨细胞诱导,并行阿利辛蓝染色鉴定糖胺多糖的合成,苏木精-伊红染色进行组织学分析,免疫荧光检测Ⅱ型胶原表达,称质量测量软骨硬度。结果与结论:分离的人脂肪间充质干细胞CD105,CD44,CD29均高表达,而CD45,CD34低表达,并且成骨成脂诱导后细胞茜素红染色和油红O染色均为阳性。三维培养法诱导的软骨细胞可表达大量糖胺多糖及Ⅱ型胶原。结果证实,三维培养法诱导人脂肪间充质细胞向软骨分化后,具有软骨细胞的特性。

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