siRNA干扰水通道蛋白3和磷脂酶D2表达对A431细胞株生长和凋亡的影响
Effects of interference with the expressions of aquaporin 3 and phospholipase D2 by small interfering RNAs on the proliferation and apoptosis of a human cutaneous squamous cell carcinoma cell line A431作者机构：杭州市中医院皮肤科310007
出 版 物：《中华皮肤科杂志》 (Chinese Journal of Dermatology)
年 卷 期：2014年第47卷第11期
页 面：772-775页
核心收录：
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
基 金：2012年浙江省自然科学基金(LY12H11010)
主 题：水通道蛋白质3 磷脂酶D RNA 小分子干扰 癌 鳞状细胞 细胞系 肿瘤
摘 要：目的 探讨水通道蛋白3（AQP3）和磷脂酶D2（PLD2）在人皮肤鳞状细胞癌细胞株A431细胞增殖和凋亡中的作用.方法 针对AQP3和PLD2各设计3条siRNA,用脂质体转染法将siRNA导入A431细胞.用荧光定量PCR方法筛选出其中干扰效果最佳的AQP3-siRNA和PLD2-siRNA,Western印迹法检测转染后AQP3和PLD2蛋白的表达水平.将A431细胞分为5组：正常培养组（不加任何处理）,转染试剂组（加入转染试剂）,阴性对照组（转染阴性对照siRNA）,AQP3-siRNA组（转染AQP3-siRNA）,PLD2-siRNA组（转染PLD2-siRNA）.CCK8法检测AQP3和PLD2表达下调对A431细胞增殖的影响,膜联蛋白-V-异硫氰酸荧光素/碘化丙锭双染色后用流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 用脂质体转染法将siRNA导入A431细胞后,AQP3和PLD2的mRNA和蛋白表达均较阴性对照组明显下降.与阴性对照组比较,转染AQP3-siRNA后A431细胞增殖在24、48、72 h均受到明显抑制（t值分别为24.10、11.00、9.54,均P0.01）;转染PLD2-siRNA后,A431细胞增殖同样在24、48、72 h均受到明显抑制（t值分别为30.47、7.02、8.73,均P0.01）.与阴性对照组比较,转染AQP3-siRNA后,A431细胞凋亡在48 h和72 h均明显增加（t值分别为11.36、20.91,均P0.01）;转染PLD2-siRNA后,A431细胞凋亡在72 h明显增加（t值为4.86,P0.05）.结论 siRNA下调AQP3或PLD2表达可抑制A431细胞增殖,诱导A431细胞凋亡.
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