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抗HIVp24单链抗体的基因构建及序列测定

CloningandSequencingofAntiHIVp24SingleChainFragmentofVariableRegionWeiYunlin,HeShaoqing,LiQihan,et al. (DepartmentofImmunology,Instituteof MedicalBiology,CAMS&PUMC,Kunming 650107) Abstract Usingphagedisplaytechnology,cDNAlibraryofantiHIVp24ScFvwasconstru

作     者:魏云林 和绍清 李琦涵 龚春梅 路虹 傅家忠 

作者机构:中国医学科学院中国协和医科大学医学生物研究所 

出 版 物:《上海免疫学杂志》 (Shanghai Journal of Immunology)

年 卷 期:1999年第19卷第1期

页      面:8-11,20页

学科分类:1010[医学-医学技术(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基  金:云南省自然科学基金 

主  题:单链抗体 噬菌体抗体库 p24蛋白 基因构建 

摘      要:应用重组噬菌体抗体系统,从经过HIV全蛋白裂解物及p24免疫过的鼠脾细胞mRNA中构建出组合单链抗体(ScFv)cDNA文库。cDNA文库克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E,转化大肠杆菌TG1,得到25×107个氨苄抗性菌落。通过噬菌体表面呈现,用p24蛋白对表达的重组噬菌体单链抗体文库进行两轮亲和富集获得一株特异性好的抗p24的噬菌体单链抗体。经ELISA鉴定,该噬菌体呈p24结合ELISA阳性的滴度小于107pfu/ml。并对ScFv进行了序列分析,对今后的应用奠定了基础。

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