用双标记时间分辨荧光免疫法同时检测黄曲霉毒素B_1和赭曲霉毒素A

作     者：黄飚 张珏 马智鸿 张艺 朱岚 金坚 谢敏浩 

作者机构：江苏省原子医学研究所无锡214063 江南大学医药学院 

出 版 物：《卫生研究》 (Journal of Hygiene Research)

年 卷 期：2009年第38卷第4期

页      面：385-388页

核心收录：

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 100403[医学-营养与食品卫生学] 10[医学] 

基　　金：科技部"863"项目(No.2008AA10Z415) 科技部中小企业科技创新基金项目(No.06C26213201075) 

主　　题：黄曲霉毒素B1 赭曲霉毒素A 时间分辨荧光免疫分析 抗体 食品检测 

摘      要：目的采用双标记时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立同时检测黄曲霉毒素B1(AFB1)和赭曲霉毒素A(OTA)的高灵敏分析方法。方法将AFB1-HRP、OTA-BSA包被96孔板为固相抗原,与游离AFB1、OTA共同竞争有限的抗AFB1多克隆抗体或抗OTA单克隆抗体,以稀土离子Eu3+标记的羊抗兔抗体、Sm3+标记羊抗鼠抗体进行示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立AFB1/OTA-TRFIA。结果该方法检测AFB1的灵敏度为0.02μg/L,测量范围为0.02～100μg/L,批内和批间变异系数(CV)分别为3.2%和7.3%,平均回收率为88.1%;检测OTA的灵敏度为0.05μg/L,测量范围为0.05～50μg/L,批内和批间CV分别为2.9%和7.9%,平均回收率为89.9%,AFB1/OTA-TRFIA检测时,AFB1与OTA不相互干扰。样品经双标记AFB1/OTA-TRFIA与单标记AFB1-TRFIA、OTA-TRFIA同时检测,与AFB1-TRFIA两者检测AFB1结果的相关系数为0.972,与OTA-TRFIA两者检测OTA结果的相关系数为0.981,说明结果相符。结论AFB1/OTA-TRFIA灵敏度高,可测范围宽,稳定性好,一次操作可以同时得到AFB1、OTA的两个结果,是一种简便、快速、经济的可进行大批量样品筛查的方法。