HLA-G α1结构域Met^(76)和Gln^(79)在KIR2DL4特异性识别中的作用研究

作     者：颜卫华 林爱芬 范丽安 YAN Wei-hua;LIN Ai-fen;FAN Li-an

作者机构：温州医学院附属浙江省台州医院临海317000 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2006年第26卷第10期

页      面：875-878页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30070784) 浙江省自然科学基金(Y205531 Y205575) 

主　　题：KIR2DL4 HLA-G 受体识别 

摘      要：目的探讨HLA-Gα1结构域中特异的Met^(76)和Gln^(79)两个位点在HLA-G特异性受体KIR2DL4识别中的作用。方法采用真核表达载体CD51neg1,克隆表达KIR2DL4胞外区与IgG Fc段的可溶性融合蛋白；利用“桥式PCR和“点突变方法,将位于HLA-G目的基因α1结构域中编码Met^(76)和Gln^(79)的密码子突变为Ala^(76,79)(HLA-mG),通过逆转录病毒表达载体分别使野生型HLA-G及其突变体在HLAI分子阴性的K562细胞上表达。流式细胞术分别测定KIR2DL4-IgG Fc融合蛋白与野生型HLA-G及Met^(76)、Gln^(79)→Ala^(76,79)HLA-G突变体结合的荧光强度,通过比较两者的平均荧光强度分析HLA-G分子Mel^(76)、Gln^(79)残基在HLA-G与其受体KIR2DL4识别过程中的作用。结果Western blot结果显示,本实验成功表达KIR2DL4-IgG Fc融合蛋白。FACS结果表明,野生型HLA-G及Met^(76)、Gln^(79)→Ala^(76,79)HLA-G突变体在K562细胞上高表达。Met^(76)、Gln^(79)突变为Ala^(76,79)后能显著影响KIR2DL4对HLA-G分子的识别。结论HLA-Gα1结构域中Met^(76)和Gln^(79)可能是其特异性受体KIR2DL4识别的关键位点。