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儿童微小病变型肾病综合征尿蛋白组的双向电泳及PDQuest图像初步分析

Preliminary analysis of urinary proteome of children minimal change nephrotic syndrome by two-dimensional gel electrophoresis and PDQuest software based image analysis

作     者:黄艳军 黄松明 张爱华 费莉 徐颂周 陈荣华 HUANG Yan-Jun;HUANG Song-Ming;ZHANG Ai-Hua;FEI Li;XU Song-Zhou;CHEN Rong-Hua

作者机构:南京医科大学小儿肾脏病研究中心江苏南京210029 

出 版 物:《第四军医大学学报》 (Journal of the Fourth Military Medical University)

年 卷 期:2006年第27卷第5期

页      面:462-465页

学科分类:1010[医学-医学技术(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基  金:江苏省自然科学基金(BK2002030) 

主  题:尿蛋白质组 双向电泳 图像分析 

摘      要:目的:建立儿童微小病变型肾病综合征尿蛋白组分析所需的固相pH梯度等电聚焦双向电泳及相关技术.方法:冷丙酮萃取肾病综合征患儿尿蛋白,去除白蛋白等高丰度蛋白、除盐,以固相IPGpH梯度等电聚焦为第一向,均一SDS胶聚丙烯酰胺凝胶(T=10%)为第二向,银染后PDQuest软件进行分析.结果:成功得到儿童微小病变型肾病综合征尿蛋白双向电泳图谱.尿蛋白用17cm,pH3-10L(线性)的IPG胶条进行二维电泳时上样量100μg,60000Vh的等电聚焦是恰当的.PDQuest7.3软件进行图像分析,检测到400个蛋白点.结论:用尿蛋白组学对儿童微小病变型肾病综合征的尿液进行研究是可行的.为今后从更高的水平来寻找肾脏疾病的功能蛋白和特异性蛋白质,阐明肾脏疾病发生发展的网络机制等后续研究提供了可能性.

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