迷迭香酸对人结肠癌HCT-8细胞增殖和凋亡的影响及分子机制研究

作     者：娄诤 陆仲夏 俞雅蓉 王大维 LOU Zheng;LU Zhong-xia;YU Ya-rong;WANG Da-wei

作者机构：浙江中医药大学第二临床医学院浙江杭州310053 浙江中医药大学生命科学学院浙江杭州310053 浙江中医药大学基础医学院浙江杭州310053 

出 版 物：《中草药》 (Chinese Traditional and Herbal Drugs)

年 卷 期：2018年第49卷第13期

页      面：3051-3055页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81373633) 浙江中医药大学基础医学院科技创新团队基金(711200E019) 

主　　题：迷迭香酸 HCT-8细胞 凋亡 p53 Puma Bax active Caspase-9 

摘      要：目的研究迷迭香酸对人结肠癌HCT-8细胞增殖和凋亡的影响,并探究相关机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度迷迭香酸作用不同时间后HCT-8细胞的增殖情况;根据CCK-8法结果确定迷迭香酸15、45、75μmol/L作用72 h,考察HCT-8细胞的凋亡和相关基因及蛋白的表达;通过流式细胞术检测HCT-8细胞的凋亡率;采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法检测p53、Bax和Puma基因的m RNA表达;通过Western blotting法检测p53、Bax、Puma和active Caspase-9的蛋白表达水平。结果迷迭香酸能够抑制HCT-8细胞的增殖,并呈时间和浓度依赖性。15、45μmol/L的迷迭香酸主要诱导HCT-8细胞早期凋亡(P0.01),75μmol/L的迷迭香酸主要诱导HCT-8细胞晚期凋亡(P0.01)。迷迭香酸可以使Puma的m RNA表达上调,并呈浓度依赖性;45、75μmol/L的迷迭香酸可以使p53和Bax的m RNA表达升高(P0.05)。迷迭香酸可以上调Puma、Bax和active Caspase-9的蛋白表达水平,并呈浓度依赖性;75μmol/L的迷迭香酸可以使p53的蛋白表达明显升高(P0.05)。结论迷迭香酸对HCT-8细胞具有明显的增殖抑制作用,并且是通过诱导凋亡实现的,促凋亡蛋白p53、Puma、Bax和active Caspase-9诱导了凋亡的发生。