前列腺癌PSA特异性树突状细胞瘤苗的构建及其体外免疫活性的观察

作     者：徐丹枫 高轶 刘玉杉 崔心刚 车建平 阴雷 邢继章 姚亚成 任吉忠 闵志廉 XU Dan-feng;GAO Yi;LIU Yu-shan;CUI Xin-gang;CHE Jian-ping;YIN Lei;XING Ji-zhang;YAO Ya-cheng;REN Ji-zhong;MIN Zhi-lian

作者机构：第二军医大学长征医院泌尿外科全军泌尿外科中心上海200003 

出 版 物：《第二军医大学学报》 (Academic Journal of Second Military Medical University)

年 卷 期：2009年第30卷第3期

页      面：265-270页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：上海市科委基金(044119615)~~ 

主　　题：树突细胞 前列腺特异抗原 前列腺癌 癌症疫苗 细胞毒性T淋巴细胞 

摘      要：目的:构建前列腺癌PSA特异性树突状细胞(PSA-DC)瘤苗,并观察其体外免疫活性,为后续研究奠定基础。方法:分离骨髓前体细胞,大量制备骨髓DCs(bone marrowd erived DC,BMDC);分别以PSA、癌细胞裂解产物(lysate,Lys)、无关蛋白卵清蛋白(Ova)冲击DC制备PSA-DC、Lys-DC、Ova-DC瘤苗。ELISA法检测PSA-DC瘤苗培养上清中细胞因子(IL-12p70和IL-1β)水平的变化;观察PSA-DC瘤苗刺激抗原特异性T细胞增殖活性和诱导抗原特异性CTL杀伤活性,并与Lys-DC、Ova-DC瘤苗及未加入抗原冲击的DC(Non-DC)组作比较。结果:成功获得成熟DC,纯度可以达到95%。ELISA法检测结果表明,PSA-DC、Lys-DC和Ova-DC组培养上清中IL-12p70和IL-1β水平均较Non-DC组明显升高(P0.05)。混合淋巴细胞培养(MLR)显示:PSA-DC、Lys-DC组DCs刺激CD4+T细胞增殖的能力明显优于Ova-DC、Non-DC组(P0.01);PSA-DC、Lys-DC组培养上清中IL-2、IFN-γ水平明显高于后两者(P0.01),而IL-10和IL-4水平下调(P0.05)。PSA-DC、Lys-DC组可产生针对PSA和肿瘤裂解物的DTH反应,而对无关抗原无效(P0.05)。与OVA-DC、Non-DC组相比,Lys-DC、PSA-DC组体外诱导的CTL细胞对LNCaP细胞的杀伤活性较强(P0.05),且具有抗原特异性。结论:利用PSA蛋白冲击DC可成功制备PSA特异性DC瘤苗,该瘤苗体外具有较强的免疫活性,能有效杀伤LNCaP细胞。