集胞藻ApcA和CpcA的体内生物重组研究

作     者：刁红丽 周婷 赵开弘 

作者机构：华中科技大学生命科学与技术学院武汉430074 武汉理工大学资源与环境工程学院武汉430070 华中农业大学生命科学技术学院武汉430070 

出 版 物：《武汉理工大学学报》 (Journal of Wuhan University of Technology)

年 卷 期：2011年第33卷第4期

页      面：43-46页

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 07[理学] 

基　　金：国家自然科学基金(30670489) 

主　　题：集胞藻 藻蓝胆素 藻蓝蛋白 变藻蓝蛋白 体内重组 

摘      要：利用聚合酶链式反应(PCR)克隆出集胞藻Synechocystis *** 6803变藻蓝蛋白和藻蓝蛋白α亚基的编码基因apcA和cpcA,将脱辅基蛋白ApcA、CpcA分别与裂合酶CpeS1或CpcE/F以及血红素氧化酶HO1、胆绿素还原酶PcyA在大肠杆菌中共同表达。研究表明:通过大肠杆菌体内重组可以获得具有光学活性的重组色素蛋白PCB-ApcA和PCB-CpcA。吸收光谱、荧光光谱以及锌电泳均表明,藻蓝胆素与脱辅基蛋白形成了正确的共价连接。由此可知,利用大肠杆菌进行集胞藻藻蓝蛋白和变藻蓝蛋白α亚基的体内生物合成是可实现的。同时还对重组色素蛋白的摩尔消光系数和荧光量子产率进行了计算。