猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白的原核表达、纯化和鉴定

作     者：江嘉欣 王钊哲 许瑞 吴思敏 李嘉静 蔡爱群 林矫矫 洪炀 陆珂 李浩 陈兆国 石耀军 朱传刚 JIANG Jiaxin;WANG Zhaozhe;XU Rui;WU Simin;LI Jiajing;CAI Aiqun;LIN Jiaojiao;HONG Yang;LUKe;LI Hao;CHEN Zhaoguo;SHI Yaojun;ZHU Chuangang

作者机构：中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室国家防治动物血吸虫病专业实验室上海200241 韶关学院英东生命科学学院 

出 版 物：《医学动物防制》 (Journal of Medical Pest Control)

年 卷 期：2018年第34卷第7期

页      面：671-675页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家重点研发计划(2017YFD0501306) 中央级公益性科研院所基本科研业务费(2017JB20) 

主　　题：猪圆环病毒 Cap蛋白 表达纯化 

摘      要：目的对猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)Cap蛋白的主要B细胞抗原表位进行分析,构建Cap表达多表位的原核表达系统,并对表达的目的蛋白进行分析,为猪圆环病毒诊断试剂开发奠定基础。方法设计并合成PCV2Cap基因,与PET-28a(+)载体连接后并转入大肠杆菌BL21(DE3)中构建重组质粒PET-28(a)-Cap,对重组质粒进行诱导表达获得重组蛋白,通过His亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。结果重组质粒在大肠杆菌中成功表达,蛋白质分子量约为17.4 k Da,与预期相符;Western blot结果显示,重组蛋白可以与猪圆环病毒阳性血清发生特异性结合。结论PCV2 Cap蛋白的表达纯化为圆环病毒血清抗体诊断方法的建立,进而为养殖场有效监控猪圆环病毒的免疫保护情况奠定基础。