miR-143调控DNMT3B表达对肝细胞癌耐阿霉素敏感性的影响

作     者：崔兵 韩正阳 万诚诚 刘纪君 贺晓珊 梅传忠 CUI Bing;HAN Zheng-yang;WAN Cheng-cheng;LIU Ji-jun;HE Xiao-shan;MEI Chuan-zhong

作者机构：蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心安徽蚌埠233030 江苏大学附属医院输血科江苏镇江212001 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233030 

出 版 物：《蚌埠医学院学报》 (Journal of Bengbu Medical College)

年 卷 期：2018年第43卷第2期

页      面：141-145页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：安徽省高校自然科学研究重点项目(KJ2016A467) 安徽省教育厅自然科学研究项目(KJ2011B094) 蚌埠医学院科技发展基金项目(Bykf12A01) 蚌埠医学院研究生科研创新项目(Byycx1410) 

主　　题：肝肿瘤 阿霉素 miR-143 DNA甲基转移酶3B 耐药 

摘      要：目的:构建耐药细胞株SMMC-7721/ADM,探讨miR-143在调控肝细胞癌耐阿霉素中的作用机制。方法:采用逐步递增阿霉素浓度法构建耐阿霉素细胞株SMMC-7721/ADM,评估其IC_(50)值;采用荧光定量PCR技术检测miR-143、DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)、多耐药基因1(MDR1)变化、Bax和Bcl-2 mRNA表达水平;Western blotting检测DNMT3B蛋白表达;通过转染miR-143 mimics上调耐药细胞株SMMC-7721/ADM中miR-143表达水平后,检测耐药细胞IC_(50)、侵袭能力、细胞凋亡、DNMT3B、MDR1变化。应用脂质体-2000瞬时转染miR-143 mimics于耐药细胞株,观察上述指标变化。结果:成功构建耐药细胞株SMMC-7721/ADM,IC_(50)值升高78.97倍(P0.01),miR-143表达量降低,DNMT3B、MDR1、Bax、Bcl-2表达量升高(P0.05~P0.01)。转染miR-143 mimics后耐药细胞株IC_(50)值降低57%,侵袭能力下降,细胞凋亡增加,DNMT3B表达减少,MDR1 mRNA表达减少(P0.01)。结论:miR-143可能通过降低DNMT3B表达提高肝细胞癌对阿霉素的敏感性。