MicroRNA-125b对人牙周膜干细胞成骨分化的影响

作     者：杜莉 曹伟靖 田莹 王原明 DU Li;CAO Wei-jing;TIAN Ying;WANG Yuan-ming

作者机构：延安大学附属医院口腔科陕西延安716000 

出 版 物：《上海口腔医学》 (Shanghai Journal of Stomatology)

年 卷 期：2018年第27卷第1期

页      面：11-17页

学科分类：1003[医学-口腔医学] 100302[医学-口腔临床医学] 10[医学] 

主　　题：牙周膜干细胞 microRNA-125b 细胞间隙连接蛋白43 

摘      要：目的:探讨micro RNA-125b(mi R-125b)对人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cell,PDLSCs)成骨分化的影响。方法:利用组织块法分离培养PDLSCs,流式细胞术检测细胞表面标志分子。PDLSCs经mi R-125b模拟物或mi R-125b抑制剂转染后,采用MTT法和LDH试剂盒分别检测细胞活性和细胞毒性,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和细胞内钙离子水平均以相应试剂盒检测,Western印迹法和RT-q PCR检测成骨相关基因水平。双荧光素酶基因报告实验检测mi R-125b对细胞间隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)的靶向调控作用。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果 :体外分离培养的PDLSCs呈现间充质干细胞特性。转染mi R-125b mimic后,PDLSCs的活性下降,毒性上升,ALP活性、钙离子水平以及成骨相关分子水平均显著下降;相反,antimi R125b提高了PDLSCs的细胞活性、ALP活性、钙离子水平以及成骨相关分子的表达。双荧光素酶基因报告实验结果表明,mi R-125b能够靶向降低Cx43基因水平。而在Cx43过表达的PDLSCs中,mi R-125b模拟物对PDLSCs成骨分化的作用被反转。结论:mi R-125b通过靶向下调Cx43而抑制PDLSCs的成骨分化。