羟基酪醇对H_2O_2损伤的神经细胞株PC12凋亡影响及其机制

作     者：刘旭东 李静 柳太云 

作者机构：遵义市第一人民医院贵州遵义563000 贵州省人民医院 

出 版 物：《山东医药》 (Shandong Medical Journal)

年 卷 期：2017年第57卷第43期

页      面：38-41页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100104[医学-病理学与病理生理学] 10[医学] 

主　　题：羟基酪醇 PC12细胞 神经细胞 嗜铬细胞瘤 细胞凋亡 凋亡基因 乳酸脱氢酶 活性氧簇 炎症因子 

摘      要：目的观察羟基酪醇对过氧化氢(H_2O_2)损伤的神经细胞株PC12凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法将第5代对数期PC12细胞分为对照组、H_2O_2组、观察组进行培养;对照组不加H_2O_2和羟基酪醇,H_2O_2组加H_2O_2,观察组加H_2O_2及羟基酪醇。细胞培养24 h,采用CCK8比色法测算各组细胞存活率,同时测定各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)和ROS,Hoechst 33258荧光染色法测算细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测各组细胞Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA,免疫印迹试验检测各组NF-κB、p-NF-κB Ser536蛋白,酶联免疫吸附测定法测定各组IL-1β和TNF-α。结果与对照组相比,H_2O_2组细胞存活率降低(P0.05)、细胞凋亡率上升(P0.05);与H_2O_2组相比,观察组细胞存活率上升(P0.05)、细胞凋亡率降低(P0.05)。与对照组相比,H_2O_2组LDH释放率和ROS水平升高(P均0.05);与H_2O_2组相比,观察组LDH释放率和ROS水平降低(P均0.05)。与对照组相比,H_2O_2组Bax mRNA相对表达量升高(P0.05)、Bcl-2 mRNA相对表达量降低(P0.05)、Caspase-3 mRNA相对表达量升高(P0.05);与H_2O_2组相比,观察组Bax mRNA相对表达量降低(P0.05)、Bcl-2 mRNA相对表达量升高(P0.05)、Caspase-3 mRNA相对表达量降低(P0.05)。与对照组相比,H_2O_2组NF-κB、p-NF-κB Ser536蛋白表达量增加(P均0.05);与H_2O_2组相比,观察组NF-κB、p-NF-κB Ser536蛋白表达量减少(P均0.05)。与对照组相比,H_2O_2组TNF-α和IL-1β的水平升高(P均0.05);与H_2O_2组相比,观察组TNF-α和IL-1β的水平降低(P均0.05)。结论羟基酪醇可抑制H_2O_2损伤的PC12细胞凋亡,其作用机制是防止LDH从细胞中释放并清除ROS、反向调节相关凋亡基因的表达,同时减少炎症靶蛋白和炎症因子的表达。