Hedgehog信号通路调控Twist高表达乳腺肿瘤干细胞样细胞的富集及迁移

作     者：周明莉 唐石伏 张海龙 柳满然 ZHOU Mingli;TANG Shifu;ZHANG Hailong;LIU Manran

作者机构：成都市第三人民医院检验科四川成都610031 重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室重庆400016 广西中医药大学第三附属医院检验科广西壮族自治区柳州545001 安顺市人民医院检验科贵州安顺561000 

出 版 物：《肿瘤》 (Tumor)

年 卷 期：2017年第37卷第10期

页      面：1024-1031,1046页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(编号:31171336) 国家自然科学基金地区科学基金项目(编号:81560430)~~ 

主　　题：乳腺肿瘤 肿瘤干细胞 Twist转录因子 Hedgehog信号通路,细胞运动 

摘      要：目的 :探讨阻断Hedgehog信号通路对Twist高表达乳腺癌干细胞样细胞微球体富集及其迁移的影响。方法:分别采用蛋白质印迹法和微球体细胞形成实验检测正常乳腺上皮MCF-10A细胞、乳腺癌MCF-7和HS578T细胞中Twist蛋白的表达水平及微球体细胞形成能力。蛋白质印迹法检测MCF-10A、MCF-7和HS578T微球体细胞中Twist、GLI1家族锌指蛋白(GLI family zincnger1,GLI1)和音猬因子(Sonic Hedgehog,SHh)蛋白的表达情况。采用不同浓度的Hedgehog信号通路特异性抑制剂GDC-0449(10、20和30μmol/L)处理Twist蛋白表达水平最高的乳腺癌HS578T微球体细胞96 h,分别采用微球体细胞形成实验和Transwell小室法检测GDC-0449对HS578T微球体细胞再成球能力和迁移能力的影响,并进一步采用蛋白质印迹法检测HS578T微球体细胞中GLI1、性别决定区Y框蛋白2(sex determining region Y-box 2,SOX2)和八聚体绑定转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)蛋白的表达情况。结果:乳腺癌HS578T细胞中Twist蛋白的表达水平明显高于MCF-10A和MCF-7细胞(P值均0.05),且具有最强的微球体形成能力(P值均0.05)。HS578T微球体细胞中Twist、GLI1和SHh蛋白水平均明显高于MCF-10A和MCF-7微球体细胞(P值均0.05);经抑制剂GDC-0449处理后,乳腺癌HS578T微球体细胞的成球能力及迁移能力均明显降低(P值均0.05),GLI1、SOX2和OCT4蛋白的表达水平明显下调(P值均0.05)。结论:阻断Hedgehog信号通路的活化可抑制Twist高表达乳腺癌细胞微球体的形成及迁移能力。