牛病毒性腹泻病毒基因分型二重RT-PCR检测方法的建立

作     者：崔元 王建昌 王金凤 袁万哲 CUI Yuan;WANG Jian-chang;WANG Jin-feng;YUAN Wan-zhe

作者机构：河北农业大学动物医学院河北保定071001 河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心河北石家庄050051 河北省兽医生物技术工程技术研究中心河北保定071001 

出 版 物：《中国兽医杂志》 (Chinese Journal of Veterinary Medicine)

年 卷 期：2017年第53卷第7期

页      面：20-23页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家质量监督检验检疫总局科技计划项目(2015IK093) 

主　　题：BVDV 二重RT-PCR 基因性 

摘      要：为了同步检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因1型和基因2型并能够加以区分,根据Gen Bank中已发表的BVDV基因1型和基因2型、牛蓝舌病病毒(BTV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪瘟病毒(CSFV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的全基因序列,采用Primer Premier 5.0软件,针对BVDV的高度保守的5 端非编码区的核苷酸序列,设计了两对特异性引物,二重RT-PCR方法扩增目的片段的大小分别为222 bp和119 bp,经过对反应体系和条件的优化,本研究建立了在同一反应体系中鉴别检测BVDV基因1型和2型的RT-PCR方法,扩增出了与预期大小相符的目的片段。该方法便捷,特异性高,敏感性强,重复性好,可作为BVDV分型鉴定和快速诊断的有效方法。