GLUD1基因对人牙髓干细胞的体外增殖、分化和矿化的影响

作     者：卢皙 刘上峰 赵守亮 LU Xi;LIU Shang-feng;ZHAO Shou-liang

作者机构：复旦大学附属华山医院口腔科上海200040 

出 版 物：《上海口腔医学》 (Shanghai Journal of Stomatology)

年 卷 期：2017年第26卷第4期

页      面：358-362页

学科分类：1003[医学-口腔医学] 1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81170951 81570965 81070825) 

主　　题：GLUD1 牙髓干细胞 成骨分化 增殖 矿化 

摘      要：目的:探索谷氨酸脱氢酶1(Glutamate dehydrogenase 1,GLUD1)基因在人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,h PDCSs)体外增殖、成骨分化和矿化中的作用。方法:体外分离培养h PDCSs,利用慢病毒感染方式沉默GLUD1基因的表达,分别采用RT-PCR和Western免疫印迹检测mRNA及蛋白水平的沉默效率。采用CCK8法检测细胞的体外增殖水平。对hDPSC进行体外成骨诱导分化培养,采用茜素红染色法检测矿化结节的形成,利用RT-PCR和免疫荧光染色分别检测Runx2、OCN基因的表达。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果:hDPSCs经过成骨诱导分化培养后,GLUD1的表达量较对照组明显上升;hDPSCs经shGLUD1病毒转染后,GLUD1表达明显下调;沉默GLUD1表达的hDPSCs体外增殖能力减弱;经成骨诱导分化培养后,与对照组相比,矿化结节形成明显减少;成骨早期标志基因Runx2上调,成骨晚期标志物OCN在mRNA和蛋白水平均显著下调。结论:沉默GLUD1表达抑制hDPSCs的体外增殖和矿化形成,影响晚期成骨分化;GLUD1在hDPSCs的成骨分化中具有重要作用。