新疆细毛羊eIF3l基因的克隆、原核表达及蛋白检测

作     者：于常江 沈敏 杨华 杨永林 祁成年 张云生 YU Changjiang;SHEN Ming;YANG Hua;YANG Yonglin;QI Chengnian;ZHANG Yunsheng

作者机构：塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室新疆石河子832000 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2017年第49卷第8期

页      面：16-20页

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

基　　金：国家"863"计划(2013AA102506) 国家自然科学基金项目(30960249) 兵团种质资源创新与功能基因发掘及利用专项(2012BB044) 

主　　题：新疆细毛羊 eIF3l基因 载体构建 原核表达 

摘      要：为了探究新疆细毛羊真核生物翻译起始因子(eukaryotic translation initiation factors,eIFs)基因eIF3l序列和原核表达蛋白特征,采用RTPCR法从新疆细毛羊成纤维细胞中克隆eIF3l基因mRNA的CDS区编码序列,构建其原核表达载体,并进行原核表达和蛋白检测。结果显示:完整获得eIF3l基因1 695 bp,共编码564个氨基酸残基;37℃,1 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导3.5 h可形成大量包涵体蛋白,其分子量约为69 ku;Western blot鉴定目的蛋白表达正确。结果表明:新疆细毛羊eIF3l基因原核表达成功,为进一步研究其功能和应用提供了科学数据。