稠李花色苷酶法制备及对H_2O_2诱导大鼠胰岛素瘤细胞损伤的保护作用

作     者：刘晓 曹向宇 李其久 孙宇航 杨思敏 于慧 王纬宇 刘剑利 

作者机构：辽宁大学生命科学院辽宁沈阳110036 

出 版 物：《食品科学》 (Food Science)

年 卷 期：2016年第37卷第6期

页      面：7-12页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 08[工学] 0805[工学-材料科学与工程（可授工学、理学学位）] 0703[理学-化学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 0822[工学-轻工技术与工程] 082203[工学-发酵工程] 083203[工学-农产品加工及贮藏工程] 

基　　金：国家自然科学基金科学部主任基金项目(31240005) 辽宁省高等学校优秀人才支持计划项目(LJQ2013002) 辽宁省高等学校科学研究一般项目(L2014007) 辽宁省科技厅农业攻关计划项目(2011211001) 辽宁大学博士科研启动项目 

主　　题：花色苷 酶法 氧化损伤 保护 大鼠胰岛素瘤(Ins-1)细胞 

摘      要：目的:探究纤维素酶酶法制备稠李花色苷的最佳条件,并研究制备的稠李花色苷对H_2O_2诱导的大鼠胰岛素瘤(Ins-1)细胞损伤的保护作用。方法:通过单因素试验和正交试验,优化得到酶法制备稠李花色苷的最佳条件;稠李花色苷处理大鼠Ins-1细胞,进行形态学观察、3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]细胞活力实验、2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯(2’,7’-dichloro dihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)荧光探针法检测细胞内活性氧实验研究稠李花色苷对H_2O_2诱导损伤的Ins-1细胞保护作用。结果:纤维素酶法提取稠李花色苷的最佳条件为:温度60℃、纤维素酶添加量9 mg/g、料液比1∶35(g/m L)、p H 3.5,此条件下稠李花色苷得率为(0.956±0.027)mg/g;形态学观察及MTT细胞活力实验显示,稠李花色苷对H_2O_2诱导损伤的Ins-1细胞具有较强的保护作用,DCFH-DA法检测细胞内活性氧实验说明,稠李花色苷能够显著地清除Ins-1细胞内的活性氧。结论:纤维素酶法制备稠李花色苷是一种有效的方法,制备的稠李花色苷对H_2O_2诱导的大鼠Ins-1细胞损伤具有较强的保护作用。