JC病毒T抗原诱发肺肿瘤转基因动物模型检测

作     者：勾文峰 赵爽 宋来 杨雪峰 郑鑫 高野康雄 郑华川 

作者机构：辽宁医学院附属第一医院肿瘤实验中心辽宁锦州121000 承德医学院附属第一医院肿瘤外科河北承德067000 神奈川县立癌中心临床研究所 

出 版 物：《中华肿瘤防治杂志》 (Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment)

年 卷 期：2014年第21卷第5期

页      面：321-324页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81172371) 沈阳市科技攻关项目(F11-264-1-10 F12-277-1-01) 

主　　题：JC病毒 T抗原 转基因鼠 肺肿瘤 

摘      要：目的:利用细胞角蛋白19(K19)启动子构建胃黏膜上皮细胞中JC病毒(John Cunningham virus,JCV)T抗原表达转基因鼠,试图建立胃黏膜自发肿瘤动物模型。方法:利用限制性内切酶NdeⅠ,酶切K19-JCV T抗原表达质粒,电泳分离带有K19启动子的T抗原核酸序列后,显微注射入C57BL/6J30只小鼠受精卵中。PCR检测转基因阳性鼠,组织学观察主要脏器的形态学表现及免疫组化检测T抗原表达。结果:显微注射K19-JCV T抗原(KT)DNA片段后成功获得11种转基因阳性鼠,其中2个月龄KT7的各脏器组织学检测显示,脑、肝、肾、食管、前胃、胃、小肠、大肠、胰腺、肺、心脏和脾组织未见异常形态学改变,JCV T抗原特异表达于胃黏膜上皮细胞和支气管上皮细胞的细胞核中,16个月龄的KT7转基因鼠13.3%(2/15)出现肺肿瘤和腺癌的病理学改变,T抗原定位于癌细胞细胞核中。结论:JCV T抗原直接诱发肺肿瘤动物模型的建立为JCV T抗原嵌入所致上皮肿瘤提供了直接的实验依据,为JCV所致上皮肿瘤发生和演进分子机制奠定基础,同时为抗肿瘤药物筛选及基因治疗监控提供了良好的动物模型。