热休克基因mRNA定量RT-PCR检测方法的建立及其应用

作     者：王艳林 沈珝琲 

作者机构：中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 

出 版 物：《科学通报》 (Chinese Science Bulletin)

年 卷 期：1999年第44卷第18期

页      面：1928-1933页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：国家自然科学基金!(批准号 :39570 779) 国家"攀登"计划资助项目 

主　　题：热休克基因 mRNA 定量RT-PCR检测 热休克白质 

摘      要：广泛存在于生物细胞中的热休克蛋白 (heatshockproteins,HSP)不仅在机体的应激保护、生长发育中起重要作用 ,而且与疾病的发生密切相关 .因此 ,建立准确检测细胞中HSP基因表达水平的RT PCR方法对基础及临床研究均具有重要意义 .首先应用DNA重组技术及体外转录体系制备了一种能用作测定hsp70 ,hsp90α及hsp90 βmRNA的复合内参照RNA ;然后 ,通过对反应条件的优化、选择 ,建立了一种特异检测 3种主要的人HSP基因mRNA水平的定量RT PCR体系 .应用此体系测定了hsp70 ,hsp90α及hsp90 β在Jurkat细胞中的组成性及热诱导表达规律 .