梅毒螺旋体膜抗原基因在毕赤酵母中的表达和蛋白纯化

作     者：黄宗炎 王亚妮 朱娟莉 董兆麟 陈超 HUANG Zong-yan;WANG Ya-ni;ZHU Juan-li;DONG Zhao-lin;CHEN Chao

作者机构：西北大学生命科学学院国家微检测系统工程技术研究中心西安710069 陕西西大北美基因股份公司西安710069 

出 版 物：《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期：2006年第46卷第5期

页      面：831-834页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家"863计划"(2005AA205220) 

主　　题：梅毒螺旋体 毕赤酵母 膜抗原 表达 

摘      要：以梅毒螺旋体(Treponema ***)Nichols菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增梅毒螺旋体47kDa、17kDa和15kDa 3个膜抗原基因,克隆进毕赤酵母表达载体pPICZ B,构建重组表达载体pTP47、pTP17、pTP15,转化酵母菌株GS115,甲醇诱导表达。表达菌体裂解后通过镍离子亲和层析获得3个抗原与6xHis tag的融合蛋白,重组蛋白的获得量分别为His-TP15:4.8mg/L;His-TP 17:6.6mg/L;His-TP47:25mg/L,经SDS-PAGE鉴定纯度都在96%以上,ELISA鉴定均具有很好的抗原性。从而首次在毕赤酵母中表达出梅毒螺旋体膜抗原,为梅毒血清学检测方法开辟了新的抗原制备途径。