大鼠肝癌细胞照射后非实质细胞影响肝癌细胞基因的变化

作     者：周乐源 张勇 姚苏芮 殷媛 李杰 黄朝晖 Zhou Leyuan;Zhang Yong;Yao Surui;Yin Yuan;Li Jie;Huang Zhaohui

作者机构：江南大学附属医院/无锡市第四人民医院肿瘤放疗科无锡214062 江南大学附属医院/无锡市第四人民医院肝外科无锡214062 江南大学附属医院/无锡市第四人民医院肿瘤研究所无锡214062 江南大学附属医院/无锡市第四人民医院介入科无锡214062 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2017年第34卷第7期

页      面：1095-1098页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金（81301920、81301784） 江苏省自然科学基金（BK20151108） 中国博士后基金（2016M601758） 

主　　题：肝非实质细胞 肝癌细胞 转移 功能富集分析 信号转导通路富集分析 

摘      要：目的探讨照射后微环境对残存的肝癌细胞转移能力影响及分子机制。方法分离大鼠肝脏非实质细胞（NPCs），贴壁后进行照射，然后收集培养上清液与照射过的大鼠肝癌细胞McA-RH7777-6 Gy共培养。经不同培液上清共培养McA-RH7777-6 Gy细胞得到RH 6 Gy（与未照射NPCs上清液共培养）和RH 6 Gy-R（与照射后NPCs上清液共培养）细胞株。采用基因芯片技术检测RH 6 Gy和RH 6 Gy-R细胞中基因的表达。通过生物信息学对显著变化的基因进行分析，并利用DAVID数据库对这些变化的基因进行功能富集分析（GO-analysis）和信号转导通路富集分析（KEGG-analysis，BIOCARTA-analysis）。进行细胞划痕实验，比较RH 6 Gy细胞和RH 6 Gy-R细胞的运动迁移能力。结果基因芯片检测结果显示，RH 6 Gy-R与RH 6 Gy细胞比较，周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）、丝裂原活化蛋白激酶9（MAPK9）、细胞周期蛋白（Cyclin） A、Toll/白细胞介素-1受体相关蛋白（TIRAP）、3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1/2（PDK1/2）、磷酸肌醇3激酶（PI3K）等15个肿瘤发生发展相关基因的表达都显著高于未照射上清共培养组，且这些表达差异显著的基因多数富集在肿瘤转移相关通路，如腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信号通路、磷脂酰肌醇信号通路、Ras信号转导通路等。体外划痕实验显示，细胞划痕培养48 h后，RH 6 Gy细胞面积愈合率为（9.00±1.35）%，RH 6 Gy-R细胞面积愈合率为（41.30±6.32）%。结论经照射后的残存的肝癌表现出更强的转移能力，可能与其微环境中的NPCs相关，我们推测照射后的NPCs释放的某些细胞因子促进了肝癌残存细胞转移相关mRNA的表达，从而激活相关癌转移通路。