微杆菌属ZZJ4-1菌株的耐热尿酸氧化酶基因的克隆及重组酶性质

作     者：张鹏程 卢向锋 李倩延 林小清 刘辉 马晓航 Pengcheng Zhang;Xiangfeng Lu;Qianyan Li;Xiaoqing Lin;Hui Liu;Xiaohang Ma

作者机构：浙江大学生命科学学院浙江杭州310058 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2012年第28卷第7期

页      面：813-822页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 0836[工学-生物工程] 071005[理学-微生物学] 10[医学] 

主　　题：重组尿酸氧化酶 克隆 序列分析 微杆菌 热稳定性 

摘      要：为了研究微杆菌Microbacterium ***4-1菌株的耐热尿酸氧化酶(Uox)的性质,克隆其基因(uox),得到1个894 bp的开放阅读框。该基因与多数已报道的uox无明显同源性,仅与球形节杆菌Arthrobacterglobiformis的uox有72%的同源性。将基因插入质粒pET-15b构成pET-15b-uox表达载体,转化至Escherichiacoli BL21(DE3)中诱导表达。对重组Uox的主要理化性质研究表明:该酶由大小约为35 kDa的亚基组成;其最佳反应温度和pH分别为30℃和7.5;在65℃以下和pH 8.5～11.0范围内稳定;以尿酸为底物的Km值为0.22 mmol/L;Ag+、Zn2+、Cu2+和SDS均能完全抑制酶活,Tween 20、Tween 80和Triton X-100对酶活有一定的促进作用。该重组酶的耐热性是目前报道的重组Uox中最好的,这一特性有利于其在诊断治疗中的开发应用。