T7 启动子作用下人尿激酶原 cDNA 在大肠杆菌中的高效表达及分离纯化
High level Expression in Escherichia coli and Purification of Human pro UK cDNA作者机构：南京大学生物化学系南京大学医药生物技术国家重点实验室
出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)
年 卷 期：1997年第13卷第4期
页 面：362-367页
核心收录：
学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术]
基 金：国家"863"高技术研究发展计划
摘 要：化学合成的人尿激酶原ｃＤＮＡ克隆在表达质粒ｐＥＴ１１ｄ中，在Ｔ７启动子的作用下，经０１ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧ诱导，在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐＬｙｓＳ中获得表达。其表达量占菌体总蛋白的１５％，表达产物以无活性的包涵体形式存在。经体外变复性，Ｚｎ２＋选择性沉淀，抗体亲和柱层析，及Ｂｅｎｚａｍｉｄｉｎｅ亲和吸附，所表达的人尿激酶原被纯化为单一条带，其比活约１１００００ＩＵ／ｍｇ。
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