线粒体型蛋白frataxin在家蚕微孢子虫中的鉴定与分析

作     者：胡军华 潘国庆 许金山 芦琨 党晓群 吴正理 李艳红 周泽扬 Junhua Hu;Guoqing Pan;Jingshan Xu;Kun Lu;Xiaoqun Dang;Zhengli Wu;Yanhong Li;Zeyang Zhou

作者机构：西南大学蚕学与系统生物学研究所重庆400716 重庆师范大学生命科学学院重庆400047 

出 版 物：《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期：2008年第48卷第5期

页      面：608-615页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 0906[农学-兽医学] 09[农学] 

基　　金：国家“973项目”--重大基础研究计划(2005CB121003) 重庆市重大科技攻关(CSTC,2006AA5019) 国家茧丝绸发展风险基金(M012005-000Y-00070) 高等学校学科创新引智计划(B07045)~~ 

主　　题：Frataxin 共线性 家蚕微孢子虫 微孢子 

摘      要：【目的】Frataxin是铁硫簇相关蛋白,在线粒体代谢中起着重要作用。分析家蚕微孢子中该蛋白的结构特征,系统进化关系以及在孢子体内的转录翻译活性。【方法】基于家蚕微孢子全基因组序列,同源序列搜索获得该基因序列。进行蛋白二级结构比较,近缘物种共线性特征分析及系统进化树构建。此外构建pGEX-4T-1-Nbfra原核重组表达载体,转化***21(DE3)进行目的蛋白表达纯化,以此为抗原免疫小鼠,制备抗体,并与家蚕微孢子总蛋白进行Western免疫杂交。【结果】Nbfra蛋白缺乏进入线粒体的信号序列,功能区缺乏部分α-螺旋;frataxin基因在不同微孢子基因组中的分布具有共线性特征,表明其在基因组进化中非常保守。系统进化分析显示微孢子形成独立进化支,并且与高等真核生物近缘,说明微孢子在进化地位上比其它原虫更加高等,支持了微孢子虫是真菌的姊妹枝的进化地位假说。【结论】免疫杂交结果表明Nbfra基因家蚕微孢子虫中能正常表达与翻译。本研究为微孢子的分类地位及线体假说提供了重要的补充依据。