microRNA-1抑制心肌特异性Dicer基因缺失小鼠心脏病理性重构

作     者：罗水莲 陈宇航 石毓君 苏立 LUO Shuilian;CHEN Yuhang;SHI Yujun;SU Li

作者机构：重庆医科大学附属第二医院心内科重庆400014 四川大学华西医院病理研究室成都610041 

出 版 物：《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期：2017年第39卷第14期

页      面：1469-1475页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 071007[理学-遗传学] 10[医学] 

主　　题：Dicer,心力衰竭 microRNA-1 心脏重构 

摘      要：目的探讨microRNA-1(miR-1)对他莫昔芬(tamoxifen,TMX)诱导的心肌特异性Dicer基因缺失小鼠心脏结构重构及心功能的影响。方法采用Myh6-Cre/Loxp重组系统,通过Dicerloxp/loxp小鼠和Myh6-cre ERT小鼠杂交,获得Myh6-cre ERT/Dicerloxp/loxp小鼠。将18只8周龄雄性Myh6-cre ERT/Dicerloxp/loxp小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、miR-1治疗组。采用腹腔注射20 mg/mL TMX溶液(0.1 mL),连续注射5 d,建立心肌特异性Dicer基因缺失心力衰竭小鼠模型,对照组腹腔注射玉米油;模型建立后,miR-1治疗组通过尾静脉注射miR-1类似物(miR-1 mimic)10 nmol/只,对照组给予同等剂量生理盐水,模型组给予miRNA阴性对照试剂,2次/周。1周后,经胸二维超声心动图检测各组小鼠舒张末期左室内径(LVIDd)、收缩末期左室内径(LVIDs)、舒张末期左室容积(EDV)、收缩末期左室容积(ESV)、射血分数(EF)及左室短轴缩短率(FS),然后收集心肌标本,通过HE染色、Masson三色染色及天狼猩红染色观察小鼠心肌结构重构程度;利用原位缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated d UTP nick-end labeling,TUNEL)免疫荧光染色检测心肌组织细胞凋亡情况;通过细胞增殖指标Ki67免疫组化染色评估细胞增殖水平。结果建模后1周,模型组小鼠心功能明显下降,LVIDs及ESV均高于对照组(P0.05),EF及FS则显著低于对照组(P0.05),miR-1治疗后上述指标均较模型组明显改善(P0.05)。组织病理学检测结果显示,与对照组相比,模型组小鼠心肌细胞排列紊乱,细胞肥大,炎症细胞浸润明显,心肌纤维化显著,而治疗组小鼠心肌细胞形态正常,无明显肥大和炎性浸润,未见明显的间质纤维化;TUNEL免疫荧光染色及Ki67免疫组化染色结果显示,miR-1治疗组小鼠较模型组心肌组织凋亡比例增加(P0.05),且存在较明显的细胞增殖(P0.05)。结论 miR-1可抑制TMX诱导的心肌特异性Dicer基因缺失心力衰竭模型中心肌细胞的固有改变和间质的改变,抑制心脏结构重构,维持心功能。