基于致病基因靶点的PCR法特异性检测土壤青枯菌

作     者：郭淼淼 种斌 徐小洪 杨超 陈海涛 蒋士君 GUO Miao-miao;CHONG Bin;XU Xiao-hong;YANG Chao;CHEN Hai-tao;JIANG Shi-jun

作者机构：河南农业大学植物保护学院郑州市金水区文化路95号450002 重庆市烟草公司黔江分公司重庆市黔江区西沙南路39号409700 重庆市烟草公司重庆市江北区五江路20号400023 

出 版 物：《中国烟草学报》 (Acta Tabacaria Sinica)

年 卷 期：2012年第18卷第2期

页      面：33-36页

学科分类：09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 090402[农学-农业昆虫与害虫防治] 

基　　金：中国烟草总公司项目(110200902065) 河南省烟草公司项目"河南烟草有害生物调查研究"(2010) 

主　　题：青枯菌 土壤DNA fliC PCR检测 

摘      要：利用分子生物学手段,以***染色体上的16S rDNA ITS以及毒性质粒携带的致病性相关基因fliC为靶点,分别设计5对序列特异性引物,筛选得到了特异性扩增16SrDNA ITS保守序列的引物对RaITS-1/2以及特异性扩增病菌fliC基因片段的引物对RalfliC-F/R。比较这两对引物的扩增灵敏度、稳定性和特异性可以发现,它们均能够稳定、快速、灵敏地检测青枯菌DNA,检测灵敏度可以达到10 fg DNA/μL。在此基础上成功构建了直接检测土壤青枯菌DNA的PCR检测技术体系。