整合型碱性蛋白酶基因工程菌中抗性基因的敲除

作     者：唐雪明 邵蔚蓝 王正祥 方慧英 诸葛健 TANG Xue Ming SHAO Wei Lan WANG Zheng Xiang FANG Hui Ying ZHUGE Jian (The key laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology Southern Yangtze University, Wuxi 214036)

作者机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室无锡214036 

出 版 物：《微生物学通报》 (Microbiology China)

年 卷 期：2003年第30卷第3期

页      面：1-5页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：教育部高等学校骨干教师项目资助(No 2 0 0 065) 

主　　题：碱性蛋白酶 基因工程菌BP071 抗性基因 基因敲除 

摘      要：利用大肠杆菌载体pET 2 8a和穿梭载体 pHY30 0PL构建了敲除载体 pHK ,通过DNA变性技术和同源重组技术成功地敲除了整合型碱性蛋白酶基因工程菌BP0 71中的卡那霉素抗性基因 (Kanr) ,得到 11株敲除卡那霉素抗性基因的阳性克隆 ,并使产酶水平保持稳定。该方法的建立为基因敲除技术在工业微生物研究中应用提供了经验 。