如皋黄鸡功能未知基因C1EIP表达载体的构建及其抗小鼠血清制备
Construction of eukaryotic expression vector for Rugao yellow chicken undefined gene C1EIP and preparation of antiserum作者机构:扬州大学动物科学技术学院江苏扬州225009
出 版 物:《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)
年 卷 期:2017年第37卷第6期
页 面:1161-1166页
学科分类:08[工学] 0905[农学-畜牧学] 09[农学] 0836[工学-生物工程] 090501[农学-动物遗传育种与繁殖]
基 金:国家自然科学基金资助项目(31272429 31472087) 高等学校博士学科点专项科研基金资助课题资助项目(20103250110006) 江苏省"六大人才高峰"资助项目 江苏省优势学科资助项目
主 题:如皋黄鸡 C1EIP 功能未知基因 真核表达 抗血清
摘 要:为了深入研究鸡胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)向雄性生殖细胞分化过程,基于RNA-Seq基础,筛选出功能未知且差异极其显著的关键基因C1EIP,PCR克隆得到其编码区全长序列409bp,构建其真核表达载体pcDNA3.0-C1EIP和pEGFP-C1EIP,实现C1EIP在真核细胞内的定位表达,并以PEI包裹pcDNA3.0-C1EIP后免疫小鼠制备抗血清。间接免疫荧光检测抗血清效价为1∶10,RT-PCR和Western blot证实C1EIP真核表达载体成功表达且抗血清效果良好,为C1EIP基因在ESCs向雄性生殖细胞分化过程中的功能研究奠定了基础。