如皋黄鸡功能未知基因C1EIP表达载体的构建及其抗小鼠血清制备

作     者：李东 王飞 纪艳芹 汪怡临 王曼 张晨 王颖洁 何娜娜 靳锴 路镇宇 程少泽 张亚妮 李碧春 LI Dong;WANG Fei;JI Yan-qin;WANG Yi-lin;WANG Man;ZHANG Chen;WANG Ying-jie;HE Na-na;JIN Kai;LU Zhen-yu;CHENG Shao-ze;ZHANG Ya-ni;LI Bi-chun

作者机构：扬州大学动物科学技术学院江苏扬州225009 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2017年第37卷第6期

页      面：1161-1166页

学科分类：08[工学] 0905[农学-畜牧学] 09[农学] 0836[工学-生物工程] 090501[农学-动物遗传育种与繁殖] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31272429 31472087) 高等学校博士学科点专项科研基金资助课题资助项目(20103250110006) 江苏省"六大人才高峰"资助项目 江苏省优势学科资助项目 

主　　题：如皋黄鸡 C1EIP 功能未知基因 真核表达 抗血清 

摘      要：为了深入研究鸡胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)向雄性生殖细胞分化过程,基于RNA-Seq基础,筛选出功能未知且差异极其显著的关键基因C1EIP,PCR克隆得到其编码区全长序列409bp,构建其真核表达载体pcDNA3.0-C1EIP和pEGFP-C1EIP,实现C1EIP在真核细胞内的定位表达,并以PEI包裹pcDNA3.0-C1EIP后免疫小鼠制备抗血清。间接免疫荧光检测抗血清效价为1∶10,RT-PCR和Western blot证实C1EIP真核表达载体成功表达且抗血清效果良好,为C1EIP基因在ESCs向雄性生殖细胞分化过程中的功能研究奠定了基础。