鹅细小病毒感染雏鹅的免疫球蛋白IgG/IgM变异性研究

作     者：朱新产 邵艳红 朱峰伟 杨丽金 ZHU Xin-chan;SHAO Yan-hong;ZHU Feng-wei;YANG Li-jin

作者机构：青岛农业大学生命科学学院山东省高校植物生物技术重点实验室山东青岛266109 青岛即墨畜牧兽医局山东即墨266200 

出 版 物：《华北农学报》 (Acta Agriculturae Boreali-Sinica)

年 卷 期：2015年第30卷第1期

页      面：42-53页

核心收录：

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：山东省自然科学基金项目(ZR2011CM008) 青岛市科技基金资助项目(12-1-4-5-(2)-jch) 青岛市科技支撑计划项目(12-1-3-17-nsh) 

主　　题：雏鹅 鹅细小病毒 免疫球蛋白M/G SDS-PAGE 凝胶层析 

摘      要：为探究IgG／IgM蛋白的分子特征、理化特性及病理学相关致病机理，对鹅细小病毒感染雏鹅的免疫球蛋白Ig进行了分级分离、纯化及 IgG／IgM 蛋白质结构和功能等生化-分子生物学分析。以 GPVYZ 感染雏鹅，采用（ NH4）2 SO4分级分离鹅血清Ig，将Sephadex G-100凝胶柱在Utro-gel ACA22凝胶柱色谱工作站上串联，分步聚集纯化出鹅血清IgM／G进行SDS-PAGE和生化分析。结果显示，初级沉淀鹅血清Ig，在非还原条件下，感染组（ RD）缺失6个蛋白主带（128，114，69，59，55，48 kDa）；而在还原条件下，RD组缺失7个蛋白主带（139，128，119，113，97，94，61 kDa），新增加3个蛋白主带（64，65，36 kDa），RD组和对照组（CK）的IgM和IgG带分别增加10，7倍和1．5，2倍。表明鹅血清IgM、IgG单体的高度可变性造成了在形状构型上的多态性，其亚基条带的变化是机体抗病潜能的重要标志；纯化鹅血清IgM／G，在非还原条件下，RD组的IgG缺失150 kDa分子和重链（64 kDa），而在还原条件下，鹅血清IgG显示重链（60～70 kDa）特征蛋白带，重链62 kDa特异蛋白带仅出现在CK组的IgM／G中，同时RD的IgG还缺失91 kDa分子、IgG（ΔFc）（43 kDa）、轻链（25 kDa）蛋白带。提示GPV感染与鹅血清Ig发生相互作用，IgG与GPV感染密切相关，62 kDa重链基因可能是GPV的易感基因。试验还表明，RD组的鹅血清Ig含量仅为CK组的37％，IgG含量较IgM高2．56倍，RD组IgM、IgG比活力显著高于CK组，提示GPV拟制鹅血清IgM、IgG基因的表达，促使病毒感染雏鹅。稳定性试验显示，酸碱稳定性：鹅血清IgGIgM；热稳定性IgMIgG，RD组的IgM、IgG对碱和温度较为敏感。提示随pH值、温度的不同，Ig同时发生许多反应，GPV感染增加了鹅血清Ig的碱和温度敏感性。