Kv1．5蛋白与脂多糖诱导的血管内皮细胞损伤的相关性

作     者：许关霞 崔乐 王必蓉 余和平 许涛 Xu Meixia;Cui Le;Wang Birong;Yu Heping;Xu Tao

作者机构：华中科技大学同济医学院附属普爱医院外科ICU武汉430034 华中科技大学同济医学院附属普爱医院普通外科武汉430034 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2017年第34卷第5期

页      面：755-757页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100211[医学-妇产科学] 10[医学] 

主　　题：Kv1.5 人脐静脉内皮细胞 Kv1.5通道特异性阻滞剂 血管内皮细胞损伤 

摘      要：目的探讨Kv1.5蛋白与脂多糖（LPS）诱导的血管内皮细胞损伤的相关性。方法LPS以浓度梯度（0.5、1.0、5.0、10.0 μg/ml）及时间梯度（0、6、12、24、48 h）作用于人脐静脉内皮细胞（HUVECs），应用流式细胞仪检测细胞凋亡率，建立内皮细胞损伤模型，并通过Western blot法检测内皮细胞中Kv1.5蛋白水平；分别予以75、125、250、500 mmol/L浓度的Kv1.5特异性通道阻滞剂（MT）预处理30 min阻断Kv1.5通道后，运用流式细胞术检测内皮细胞凋亡率，酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定内皮细胞损伤标志物内皮细胞特异性分子-1（endocan）、血管细胞间黏附分子-1（VCAM-1）的浓度。结果LPS浓度为0.5、1.0、5.0、10.0 μg/ml刺激HUVECs 24 h，内皮细胞凋亡率分别为（33.530±1.266）%、（35.530±0.551）%、（48.270±0.901）%、（51.600±2.179）%，与对照组比较差异有统计学意义（P值分别为0.025、0.027、0.011、0.004），且在LPS 5.0 μg/ml时作用最显著；LPS（5.0 μg/ml）处理内皮细胞6、12、24、48 h，内皮细胞凋亡率分别为（30.200±1.113）%、（32.470±0.814）%、（46.630±0.513）%、（50.870±1.498）%，与对照组比较差异有统计学意义（P值分别为0.027、0.025、0.012、0.006），并且在24 h时作用最明显；建立内皮细胞损伤模型适宜的条件为5.0 μg/ml LPS刺激HUVECs 24 h；同时可见不同浓度LPS组Kv1.5蛋白表达明显上调（P值分别为0.036、0.027、0.008、0.005），12、24、48 h时LPS组Kv1.5蛋白表达亦上升（P值分别为0.004、0.036、0.007），Kv1.5蛋白表达与LPS呈一定的浓度及时间依赖性。与LPS组比较，不同浓度梯度MT组（75、125、250、500 mmol/L）内皮细胞凋亡率明显降低（P值均为0.000），且细胞损伤标志物endocan（P值分别为0.001、0.000、0.001、0.006）及VCAM-1分泌减少（P值分别为0.006、0.000、0.000、0.000）。结论内毒素诱导损伤的血管内皮细胞表达Kv1.5蛋白增多；阻断Kv1.5通道能减轻内毒素诱导的血管内皮细胞损伤。